
細(xì)胞增殖
- 細(xì)胞增殖
- 細(xì)胞毒性
- 藥物篩選
- 活性檢測(cè)
服務(wù)特色
金開(kāi)瑞提供MTT/CCK-8檢測(cè)服務(wù),可用于細(xì)胞增殖活性、細(xì)胞毒性檢測(cè);藥物篩選(包括藥物劑量及給藥時(shí)機(jī)的篩選,評(píng)價(jià)藥物的安全性等);活性分子、蛋白抗體、細(xì)胞因子等的活性檢測(cè)。
服務(wù)介紹
金開(kāi)瑞提供MTT/ CCK-8 Colony Forming檢測(cè)服務(wù), 可用于細(xì)胞增殖活性、細(xì)胞毒性檢測(cè); 藥物篩選 (包括藥物劑量及給藥時(shí)機(jī)的篩選, 評(píng)價(jià)藥物的安全性 等);活性分子、蛋白抗體、細(xì)胞因子等的活性檢測(cè)。
服務(wù)流程
客戶提供
生長(zhǎng)狀態(tài)良好的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)條件(凍存細(xì)胞需用干冰運(yùn)輸,培養(yǎng)細(xì)胞樣品用裝滿培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶寄送,瓶口用封口膜封好);
需準(zhǔn)確告知實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)內(nèi)容,如樣本濃度等,并提供實(shí)驗(yàn)所需藥物等。
最終交付
- 實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)、圖片、分析結(jié)果;
- 實(shí)驗(yàn)流程及完整報(bào)告一份。
服務(wù)說(shuō)明
| 服務(wù)項(xiàng)目 | 細(xì)分 | 服務(wù)周期 (工作日) |
| 細(xì)胞增殖/細(xì)胞毒性 |
MTT |
12 |
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CCK8 |
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|
Colony Forming |
30-35 |
案例展示
常見(jiàn)問(wèn)題與解析 (Q&A)
細(xì)胞增殖相關(guān)實(shí)驗(yàn)包括有MTT/CCK8、EdU摻入、(軟瓊脂)克隆形成和細(xì)胞周期檢測(cè)。 MTT/CCK8:一般在基因表達(dá)水平干預(yù)、細(xì)胞因子或藥物干預(yù)等條件下,培養(yǎng)細(xì)胞后加入MTT/CCK8,反應(yīng)的是細(xì)胞總體代謝活力水平,通過(guò)多孔板光度計(jì)(酶標(biāo)儀)獲取數(shù)值,可繪制細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線。 EdU摻入:在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中EdU,通過(guò)DNA合成水平,反應(yīng)細(xì)胞增殖狀態(tài)及比例,后續(xù)通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀獲取數(shù)據(jù)。 (軟瓊脂)克隆形成:不同干預(yù)處理的細(xì)胞,在培養(yǎng)孔板中或鋪有低熔點(diǎn)瓊脂糖的培養(yǎng)孔板中,培養(yǎng)2周左右觀察其形成單克隆的能力。軟瓊脂克隆形成主要用于懸浮細(xì)胞,或者在研究貼壁細(xì)胞的抗失巢凋亡(anoikis)能力時(shí)。 細(xì)胞周期:實(shí)驗(yàn)細(xì)胞經(jīng)過(guò)PI染色后,進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析,可以獲得細(xì)胞在各個(gè)細(xì)胞周期(G1/G2/M)的分布比例。
相關(guān)技術(shù)服務(wù)
| ? 細(xì)跑調(diào)亡 | ? 細(xì)胞遷移及侵襲 | ? 細(xì)胞衰老檢測(cè) |
| ? 細(xì)胞周期 | ? 克隆形成(Colony Forming) | ? PKH26染色 |
| ? 細(xì)胞劃痕 | ? 活性氧檢測(cè) | |
相關(guān)資源
1、 有哪些檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法?
在細(xì)胞增殖檢測(cè)中,MTT、CCK-8和Colony Forming是常用的方法之一。它們都有各自的優(yōu)勢(shì)和適用范圍,因此使用頻率相對(duì)較高。
MTT測(cè)定和CCK-8測(cè)定是常用的間接評(píng)估細(xì)胞增殖活性的方法,特別適用于高通量篩選和快速獲得結(jié)果。它們?cè)诩?xì)胞代謝活性的評(píng)估方面比較方便,因此在許多實(shí)驗(yàn)中被廣泛采用。
Colony Forming實(shí)驗(yàn)則用于評(píng)估細(xì)胞的克隆生成能力和增殖能力,通過(guò)直接觀察和計(jì)數(shù)形成的細(xì)胞集落來(lái)推斷細(xì)胞增殖能力。這種方法在研究細(xì)胞增殖能力和克隆性方面更為直接,常用于細(xì)胞生物學(xué)和腫瘤學(xué)研究中。
其他的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法如BrdU標(biāo)記、Ki-67免疫染色、流式細(xì)胞術(shù)和細(xì)胞計(jì)數(shù)等也在特定的研究領(lǐng)域和實(shí)驗(yàn)中得到廣泛應(yīng)用。
總體而言,選擇使用哪種方法取決于研究的目的、細(xì)胞類型、實(shí)驗(yàn)條件以及實(shí)驗(yàn)室的偏好。不同的方法可以提供不同的信息和實(shí)驗(yàn)結(jié)果,所以在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)需要綜合考慮各種因素。
2、 細(xì)胞增殖檢測(cè)方法的介紹和優(yōu)劣勢(shì)對(duì)比
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方法 |
原理 |
優(yōu)勢(shì) |
劣勢(shì) |
| MTT測(cè)定 |
細(xì)胞將MTT溶液還原為紫色結(jié)晶體, 通過(guò)溶解和測(cè)量吸光度評(píng)估細(xì)胞增殖活性 |
簡(jiǎn)單、成本低、適用于高通量篩選 | 不能直接確定細(xì)胞數(shù)量,耗時(shí) |
| CCK-8測(cè)定 |
細(xì)胞將CCK-8溶液中的染料還原為有顏色的產(chǎn)物, 通過(guò)測(cè)量吸光度評(píng)估細(xì)胞增殖活性 |
快速、簡(jiǎn)便、適用于高通量篩選 | 不能直接確定細(xì)胞數(shù)量,對(duì)少量細(xì)胞可能不敏感 |
| Colony Forming | 細(xì)胞形成集落,通過(guò)計(jì)數(shù)集落數(shù)量評(píng)估細(xì)胞增殖能力 | 直接評(píng)估細(xì)胞克隆生成能力和增殖能力 | 較長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間,依賴細(xì)胞克隆生成能力 |
| BrdU標(biāo)記 |
細(xì)胞在培養(yǎng)基中攝取BrdU, 通過(guò)檢測(cè)BrdU存在來(lái)評(píng)估正在進(jìn)行DNA復(fù)制的細(xì)胞 |
直接標(biāo)記正在進(jìn)行DNA復(fù)制的細(xì)胞 | 需要特定抗體,不能區(qū)分細(xì)胞階段 |
| Ki-67免疫染色 | 檢測(cè)細(xì)胞中Ki-67蛋白的表達(dá),其在細(xì)胞增殖過(guò)程中高表達(dá) | 直接標(biāo)記正在進(jìn)行細(xì)胞增殖的細(xì)胞 | 不能區(qū)分細(xì)胞階段,依賴特定抗體 |
| 流式細(xì)胞術(shù) | 利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞數(shù)量、大小和DNA含量等參數(shù) | 快速、可獲取多個(gè)參數(shù)信息 | 對(duì)設(shè)備要求較高,需要單個(gè)細(xì)胞懸浮 |
| 細(xì)胞計(jì)數(shù) | 通過(guò)顯微鏡觀察和手工計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量來(lái)確定細(xì)胞增殖 | 直接計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量 | 耗時(shí),適用于少量細(xì)胞和小培養(yǎng)皿 |
3、 當(dāng)涉及到細(xì)胞增殖檢測(cè)方法的使用時(shí),一些常見(jiàn)的研究領(lǐng)域和實(shí)驗(yàn)應(yīng)用的示例
①腫瘤學(xué)研究:
? TT測(cè)定:評(píng)估腫瘤細(xì)胞系對(duì)抗腫瘤藥物的敏感性和抗藥性。
? Colony Forming:評(píng)估腫瘤干細(xì)胞的克隆生成能力和增殖能力。
? Ki-67免疫染色:檢測(cè)腫瘤組織中Ki-67的表達(dá)水平,評(píng)估腫瘤細(xì)胞的增殖活性。
②藥物篩選和毒性研究:
? CCK-8測(cè)定:進(jìn)行高通量篩選,評(píng)估化合物對(duì)細(xì)胞增殖的影響。
? 流式細(xì)胞術(shù):測(cè)定細(xì)胞周期分布,判斷藥物對(duì)細(xì)胞周期的影響。
? MTT測(cè)定:評(píng)估藥物或化合物的細(xì)胞毒性作用。
③組織工程和再生醫(yī)學(xué):
? Colony Forming:評(píng)估干細(xì)胞的增殖和分化能力,用于組織工程和再生醫(yī)學(xué)研究。
? 細(xì)胞計(jì)數(shù):計(jì)算細(xì)胞數(shù)量以確定組織工程支架的細(xì)胞種植密度。
④免疫學(xué)研究:
? BrdU標(biāo)記:標(biāo)記正在進(jìn)行DNA復(fù)制的免疫細(xì)胞,評(píng)估免疫細(xì)胞增殖活性。
? Ki-67免疫染色:檢測(cè)免疫細(xì)胞中Ki-67的表達(dá),評(píng)估其增殖能力和激活狀態(tài)。
這些只是一些示例,實(shí)際上在各個(gè)研究領(lǐng)域和實(shí)驗(yàn)中可以使用不同的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法。選擇合適的方法需要考慮研究問(wèn)題、細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)條件等因素,并根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行決策。


