大腸桿菌表達系統
- 蛋白表達
- 大腸桿菌表達系統
- 目標蛋白表達
服務特色
蛋白表達是現代工業、醫療和基礎研究領域的重要組成部分，金開瑞蛋白表達平臺可針對目的蛋白的特殊性質，專業解決蛋白表達相關難題，如蛋白產量較低、蛋白表達為包涵體、表達蛋白沒有活性、表達特殊蛋白（如膜蛋白、毒性蛋白等）、制備蛋白復合物、特殊氨基酸標記技術等，幫助您獲得任意想要的蛋白。
服務介紹
大腸桿菌重組蛋白表達利用大腸桿菌細胞內的轉錄和翻譯機制來合成外源基因中的目標蛋白質。通常通過將目標基因插入到表達載體中，該載體包含適當的啟動子和調控序列，以控制目標蛋白質的表達水平。
金開瑞蛋白表達平臺已成功為全球各地客戶提供3000余種重組蛋白產品，涵蓋人類疾病相關蛋白（細胞因子、激素、酶、病毒抗原、重組抗體、片段抗體）、動植物蛋白和微生物蛋白。
服務優勢
- 高表達水平：大腸桿菌能夠實現高水平的目標蛋白質表達，提供大量蛋白質產物。
- 簡單和經濟：大腸桿菌的培養和維護相對簡單，成本較低。
- 快速表達：大腸桿菌具有較短的生命周期，可以迅速表達目標蛋白質。
- 易于遺傳操作：大腸桿菌有豐富的遺傳工具和表達載體，便于遺傳操作和蛋白質工程。
- 多樣化的宿主菌株：有多個可選的宿主菌株，適用于不同表達需求和表達策略。
- 適用于小型蛋白質：大腸桿菌表達系統對小型蛋白質如多肽和酶等的表達效果較好。
服務流程
服務說明
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服務名稱 |
服務內容 | 交付內容 | 服務周期 |
| 普通型大腸桿菌重組蛋白表達 | 表達載體構建 |
表達質粒 |
1周 |
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測序報告 |
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| 感受態轉化 |
表達菌株 |
3工作日 | |
| 表達菌株篩選 |
SDS-PAGE圖譜 |
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| 蛋白表達純化 | 蛋白純品(>90%純度) | 2-3周 | |
| 標簽切除 |
SDS-PAGE圖譜 |
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| 包涵體復性 |
蛋白純品(>90%純度) |
2-3周 | |
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SDS-PAGE圖譜 |
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| 上清保證型大腸桿菌重組蛋白表達 | 表達載體構建 |
表達質粒 |
1周 |
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測序報告 |
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| Arctic表達菌株篩選 |
表達菌株 |
3工作日 | |
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SDS-PAGE圖譜 |
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| 蛋白表達純化 | 蛋白純品(>90%純度) | 3-4周 | |
| 標簽切除 |
SDS-PAGE圖譜 |
案例展示
大腸桿菌表達系統
1. GFP蛋白原核表達通常以包涵體形式表達，普通光源下極難觀察到綠色熒光。金開瑞通過對GFP序列進行突變，并對啟動子進行篩選，優化培養條件，控制表達速率，用大腸桿菌表達的GFP蛋白，完全以可溶形式表達，自然光下可見強烈的綠色熒光。
2. 客戶經過嘗試在大腸桿菌DE3中表達目的蛋白A，未能獲得上清蛋白，金開瑞采用Arctic Express表達體系，采用低溫誘導和分子伴侶共表達方式，歷經40個工作日，獲得了在上清中表達的目的蛋白，得到客戶的認可。
3. 客戶經過嘗試在大腸桿菌DE3中表達目的蛋白B，目的蛋白表達為包涵體。但是客戶需要上清表達的蛋白進行后續實驗，經過金開瑞Arctic Express表達體系，歷經35個工作日，獲得了在上清中表達的目的蛋白。
相關資源
大腸桿菌重組蛋白表達技術在生物制藥、工業酶生產、研究用蛋白質合成、診斷試劑生產以及蛋白質工程和改造等領域都具有廣泛的應用。例舉如下：
1、生物制藥：大腸桿菌重組蛋白表達是制備生物制藥品的重要方法之一。它被用于合成各種重組蛋白藥物，如重組抗體、人類蛋白激素、疫苗等。這些藥物用于治療癌癥、炎癥性疾病、免疫缺陷等疾病。
2、工業酶的生產：大腸桿菌重組蛋白表達被廣泛應用于合成各種工業酶，如纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶等。這些酶在紡織、食品、洗滌劑等工業中起著重要作用。
3、研究用蛋白質的合成：大腸桿菌重組蛋白表達用于合成研究所需的蛋白質。研究人員可以通過表達目標蛋白質來研究其結構、功能、相互作用等。這對于生命科學研究、藥物發現和基因工程等領域具有重要意義。
4、診斷試劑的生產：大腸桿菌重組蛋白表達被用于生產各種診斷試劑，如酶聯免疫吸附測定（ELISA）試劑盒、免疫印跡試劑盒等。這些試劑用于臨床診斷、疾病監測和藥物篩選等應用。
5、蛋白質工程和改造：大腸桿菌重組蛋白表達可用于進行蛋白質工程和改造。通過改變目標蛋白質的基因序列，可以實現蛋白質的定點突變、融合蛋白質的構建、蛋白質標記和純化等。
需要注意的是，大腸桿菌重組蛋白表達系統雖然在很多應用中被廣泛使用，但也存在一些局限性。例如，大腸桿菌可能無法正確表達復雜蛋白質或進行特定的翻譯后修飾。因此，對于特定的蛋白質和應用需求，需要綜合考慮其他表達系統的優勢和限制，從而選擇最合適的表達方法。
