細胞遷移及侵襲
- 細胞遷移
- 細胞侵襲
- Transwell
- 趨化因子
- 透明質膜孔板
服務特色
Transwell實驗是一種常用的細胞遷移和侵襲能力評估方法，通過透明質膜孔板模擬體內環境，提供簡單易行、可定量測量和高可重復性等特色，廣泛應用于細胞遷移和侵襲研究。
服務介紹
Transwell是一類有通透性的杯狀的裝置，放入培養板后，分為兩室：Transwell小室內稱上室，盛裝上層培養液；培養板內稱下室，盛裝下層培養液。上下層培養液以聚碳酸酯膜相隔，以此研究下層培養液中的成分對細胞生長、運動等的影響。Transwell檢測技術服務，用于測定細胞遷移及侵襲。
服務優勢
- 簡單易行：Transwell實驗操作相對簡單，不需要復雜的設備和技術，降低了實驗的難度和門檻。
- 可定量測量：Transwell實驗可以通過染色或其他方法準確測量下室中遷移或侵襲的細胞數量，提供可靠的數據支持，便于對細胞遷移和侵襲能力進行定量分析。
- 高可重復性：透明質膜孔板具有一致的微孔結構，保證實驗的重復性和可比性，減少實驗誤差，使得實驗結果更具可信度。
- 模擬體內環境：Transwell實驗中透明質膜孔板模擬細胞在體內組織間遷移和侵襲的生理環境，有助于更真實地研究細胞行為和生理過程。
- 靈活性強：Transwell實驗可根據研究需要選擇不同孔徑的透明質膜孔板，適用于不同細胞類型和研究對象，具有較大的靈活性。
- 適用于高通量篩選：Transwell實驗可以批量進行，適用于高通量篩選藥物或影響細胞遷移、侵襲的因素，提高了實驗的效率和產出。
服務流程
客戶提供
生長狀態良好的實驗細胞及細胞培養條件（凍存細胞需用干冰運輸，培養細胞樣品用裝滿培養液的培養瓶寄送，瓶口用封口膜封好）；
需準確告知實驗設計內容，如樣本濃度等，并提供實驗所需藥物等。
最終交付
- 實驗原始數據、圖片、分析結果；實驗流程及完整報告一份
服務說明
| 服務項目 | 細分 | 注釋 | 服務周期（工作日） |
| 細胞遷移/細胞侵襲 | Transwell（不用Matrigel） | 用于檢測細胞遷移 | 12 |
| Transwell（用Matrigel） | 用于檢測細胞侵襲 |
案例展示
常見問題與解析 (Q&A)
Transwell小室上下層由聚碳酸酯膜分隔，膜上有3-8μm不同規格孔徑的小孔。不鋪Matrigel膠時細胞的穿膜過程體現其遷移能力；當鋪有Matrigel膠時細胞穿膜需分泌基質金屬蛋白酶（MMPs）等基質水解酶類，此時體現的是細胞的侵襲能力。所得數據為顯微鏡下拍照及細胞計數結果。
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1、Transwell實驗步驟
● 預處理透明質膜孔板：將透明質膜孔板浸泡在適當的溶液中，如無菌PBS或細胞培養基，去除可能的殘留物質，確保透明質膜孔板的清潔和無菌。
● 細胞處理：將需要研究的細胞分散成單細胞懸浮液，根據實驗需要，可預處理細胞，例如暴露于趨化因子或藥物。
● 上室孔板裝配：將預處理后的細胞懸浮液加入透明質膜孔板的上室，注意控制細胞數量和濃度，確保均勻分布。
● 下室孔板裝配：在透明質膜孔板的下室中加入相應的培養基，通常含有趨化因子或其他試劑，以吸引細胞遷移或侵襲。
● 孔板培養：將上下室裝配的透明質膜孔板置于細胞培養箱中，進行培養，根據研究需要，可以調節培養時間。
● 細胞固定和染色：培養結束后，取出透明質膜孔板，將細胞固定，通常使用甲醛或乙醇等，然后進行染色。
● 細胞觀察和計數：觀察透明質膜孔板上下室中的細胞，根據實驗目的選擇適當的染色方法進行細胞計數或其他定量分析。
● 數據分析：根據實驗結果進行數據統計和分析，比較不同組別的細胞遷移或侵襲能力。
Transwell實驗可以根據研究目的進行適當的調整和改進，實驗步驟可能會因具體實驗設計而有所差異。
2、研究細胞遷移和侵襲的方法對比介紹
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方法名稱 |
簡介 |
優點 |
試用范圍 |
局限性 |
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Transwell實驗 (透明質膜孔板法) |
通過透明質膜孔板模擬細胞遷移和侵襲，定量測量細胞數量 |
定量化測量細胞數量，高通量篩選 |
適用于體外細胞遷移和侵襲評估，高通量篩選等 |
無法模擬組織間的復雜環境，不適用于體內實驗 |
|
Scratch實驗 (劃痕實驗) |
在細胞培養皿中形成劃痕，觀察細胞填充劃痕的能力 |
簡單易行 |
適用于初步評估細胞遷移能力，簡單易行 |
無法模擬體內環境，只能提供定性信息 |
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Boyden室外實驗 (Boyden室外遷移實驗) |
利用孔板上下兩室的梯度形成細胞遷移差異，評估細胞遷移能力 |
相對簡單，不需要特殊設備 |
適用于體外細胞遷移評估，操作相對簡單 |
不適用于定量測量，無法模擬復雜的體內情況 |
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3D細胞遷移模型 (三維細胞遷移模型) |
使用三維結構模擬細胞遷移，貼近體內環境 |
貼近體內環境，更貼近真實情況 |
適用于模擬復雜的生理環境，更貼近體內情況 |
實驗步驟復雜，需要特殊設備，較為耗時 |
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軟瓊脂膜法 (軟瓊脂孔板法) |
在瓊脂膜上培養細胞，觀察細胞在軟質基質上的遷移能力 |
適用于生物力學研究，模擬軟組織環境 |
只能提供定性信息，不適用于定量測量 |
需要特殊瓊脂膜基質和培養條件 |
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體內實驗 |
使用動物模型研究細胞遷移和侵襲過程，具有較高的生物學相關性 |
較高的生物學相關性，模擬復雜體內環境 |
適用于研究細胞在復雜體內環境下的行為 |
涉及動物實驗，存在倫理和法規限制，費用較高 |
3、Transwell的應用舉例
● 癌癥研究：Transwell可用于評估癌細胞的侵襲和轉移能力，研究腫瘤轉移機制和藥物干預。例如，通過在Transwell上層培養癌細胞，并在下層添加模擬腫瘤組織的基質，可以模擬腫瘤細胞侵襲過程，并評估抑制劑對侵襲的影響。
● 免疫學研究：Transwell可用于研究細胞遷移和細胞-細胞相互作用對免疫細胞活性的影響。例如，通過在Transwell上層培養免疫細胞，并在下層添加刺激物質，可以模擬炎癥反應或免疫細胞之間的相互作用。
● 神經生物學研究：Transwell可用于模擬神經元遷移和軸突生長過程，研究神經發育和修復機制。例如，通過在Transwell上層培養神經細胞，并在下層添加趨化因子，可以評估神經元遷移和軸突生長的能力。
● 細胞信號傳導研究：Transwell可用于研究細胞間信號傳導和細胞-細胞相互作用對細胞功能的調控。例如，通過在Transwell上層培養信號發出細胞，并在下層添加接受細胞，可以模擬細胞間的信號傳導和相互作用。
● 藥物篩選和藥物透過性研究：Transwell可用于評估化合物的透過性和細胞攝取能力，以進行藥物篩選和藥物傳遞研究。例如，通過在Transwell上層培養細胞，并在上下層分別添加藥物溶液，可以評估藥物的透過性和細胞攝取情況。
