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為什么眾多科研人員選擇金開瑞的Co-IP檢測(cè)服務(wù)
采用特異性二抗進(jìn)行檢測(cè)，有效避免抗體重鏈對(duì)結(jié)果的信號(hào)干擾
優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件和技術(shù)流程，確保檢測(cè)結(jié)果的靈敏度和可靠性
每一步實(shí)驗(yàn)都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性
標(biāo)準(zhǔn)流程優(yōu)化，縮短實(shí)驗(yàn)周期，快速交付高質(zhì)量結(jié)果
免疫共沉淀技術(shù)（Co-Immunoprecipitation, Co-IP）是研究兩種蛋白在體內(nèi)是否存在相互作用的有效方法。
通過抗體和已知蛋白結(jié)合，從而捕獲整個(gè)已知蛋白復(fù)合物，進(jìn)而研究復(fù)合物中與已知蛋白存在相互作用的蛋白。
金開瑞提供專業(yè)的Co-IP檢測(cè)服務(wù)，改進(jìn)技術(shù)使用特異性二抗進(jìn)行分子互作檢測(cè)，能有效避免抗體重鏈對(duì)結(jié)果的信號(hào)干擾。
我們承諾：若實(shí)驗(yàn)結(jié)果未達(dá)到合同要求，可提供完善的售后服務(wù)
標(biāo)準(zhǔn)化流程確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠
客戶提交樣品及相關(guān)信息，我們進(jìn)行樣品驗(yàn)收和登記
制備樣品裂解液，并進(jìn)行蛋白定量，確保實(shí)驗(yàn)材料符合要求
將樣品與抗體及protein A/G凝膠進(jìn)行孵育，形成免疫復(fù)合物
收集免疫沉淀物，進(jìn)行洗滌去除非特異性結(jié)合，制備樣品
通過Western Blot檢測(cè)目標(biāo)蛋白及相互作用蛋白
提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告和數(shù)據(jù)解讀，確保客戶獲得有價(jià)值的結(jié)果
為確保實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，請(qǐng)?zhí)峁┮韵虏牧?/p>
| 服務(wù)名稱 | 服務(wù)內(nèi)容 | 交付內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn) | 服務(wù)周期(工作日) |
|---|---|---|---|
| 免疫共沉淀Co-IP | 蛋白提取 | 1個(gè)樣本 | 16 |
| Co-IP前wb | 跑膠1個(gè)泳道 | ||
| Co-IP | 富集2次：IgG、IP各1次 | ||
| Co-IP后誘餌蛋白wb | 跑膠3個(gè)泳道：IgG、IP、input | ||
| SDS-PAGE銀染 | 跑膠3個(gè)泳道：IgG、IP、input | 4 | |
| 質(zhì)譜鑒定互作蛋白 | 質(zhì)譜鑒定：IgG、IP | 10-15 |
眾多成功案例，驗(yàn)證我們的專業(yè)能力
通過Co-IP技術(shù)成功驗(yàn)證兩種蛋白在體內(nèi)的相互作用，結(jié)果為后續(xù)功能研究提供有力證據(jù)。
（文獻(xiàn)：Aberrant oligodendroglial LDL receptor orchestrates demyelination in chronic cerebral ischemia. 期刊：J Clin Invest IF：13.6）
利用Co-IP結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)，成功鑒定目標(biāo)蛋白的相互作用網(wǎng)絡(luò)，揭示新的生物學(xué)功能。
（文獻(xiàn)：PFN1 Inhibits Myogenesis of Bovine Myoblast Cells via Cdc42-PAK/JNK. 期刊：Cells IF：5.2）
免疫共沉淀（Co-IP）技術(shù)主要用于：
CoIP實(shí)驗(yàn)需要保證足夠的蛋白濃度才能維持原本存在的蛋白互作狀態(tài)，尤其當(dāng)?shù)鞍棕S度較低、相互作用力不強(qiáng)、使用不易提蛋白組織等情況時(shí)。而且CoIP的實(shí)驗(yàn)條件往往需要反復(fù)摸索。因此用于CoIP實(shí)驗(yàn)需準(zhǔn)備細(xì)胞＞2x10^7，動(dòng)物組織＞500mg，植物組織＞2g，并且須更加注意采集后速凍-80℃保存和避免反復(fù)凍融。
a.所使用的抗體不僅需要優(yōu)秀的親和力、特異性，其識(shí)別表位還可能被互作蛋白所掩蔽（主要是使用單抗時(shí)）；
b.當(dāng)?shù)鞍谆プ黜毎l(fā)生在特定生理代謝條件、組織細(xì)胞類型之中時(shí)，CoIP實(shí)驗(yàn)可能無法獲得互作結(jié)果；
c.如果誘餌蛋白和或捕獲蛋白在樣本中豐度很低時(shí)； d.兩個(gè)互作蛋白的親和力較弱；
e.當(dāng)該蛋白互作需要較特定的離子強(qiáng)度，或者需要如Ca2+離子/Mg2+離子/ATP等輔因子時(shí)，要?jiǎng)?chuàng)造合適的反應(yīng)條件會(huì)變得困難；
f.一些樣品處理提取存在難度，提取足量目的蛋白與保持蛋白天然狀態(tài)，需通過實(shí)驗(yàn)條件達(dá)到優(yōu)化平衡；
g.外源表達(dá)的標(biāo)簽蛋白存在同內(nèi)源蛋白的位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)，這主要在使用標(biāo)簽抗體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)可能存在。
在CoIP-WB鑒定結(jié)果中，IgG組無目的蛋白條帶、IP組有目的蛋白條帶，說明IP過程成功；銀染膠圖中，IP組相對(duì)于IgG組有更多蛋白條帶、且存在差異，說明CoIP過程捕獲到互作蛋白；IP產(chǎn)物在質(zhì)譜檢測(cè)中鑒定到的蛋白數(shù)量不能作為判斷實(shí)驗(yàn)成敗的標(biāo)準(zhǔn)，因?yàn)檫@取決于目的蛋白本身所具有的互作蛋白數(shù)量、結(jié)合力強(qiáng)弱等方面；IP產(chǎn)物的質(zhì)譜鑒定數(shù)量越多并不代表結(jié)果越好。
提交您的項(xiàng)目需求，我們的技術(shù)專家將在24小時(shí)內(nèi)與您聯(lián)系，提供專業(yè)解決方案
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