微量熱泳動（MST）
- 免標記
- 樣品量少
- 快速檢測
- 溶液態(tài)接近生理
- 適用性廣
服務(wù)特色
MST技術(shù)是一種基于溫度梯度誘導(dǎo)分子遷移的免標記互作檢測方法，可在溶液態(tài)、近生理條件下精準測量分子間親和力。特別適用于小分子藥物篩選、蛋白-核酸互作、弱結(jié)合體系分析等，兼具高靈敏、快速、樣品消耗少等優(yōu)勢，是SPR技術(shù)的重要補充與替代選擇。
服務(wù)介紹
微量熱泳動是一種表征生物分子特性的光學(xué)方法，是粒子在微觀溫度梯度中的定向運動。生物分子的質(zhì)量、電荷、水化層和構(gòu)象發(fā)生改變均可導(dǎo)致分子在溫度梯度場中運動速度的變化，這種變化可以用來分析分子間相互作用以及各種化學(xué)劑量學(xué)參數(shù)。將波長為1480 nm 的紅外激光照射于熒光激發(fā)光路上，通過分色鏡照射到毛細管中的樣品，樣品中的水分子吸收紅外光發(fā)熱而形成溫度梯度。MST 儀器通過記錄激光器打開前、打開期間和打開后處于溫度梯度中的樣品內(nèi)部紅外激光照射區(qū)域的熒光變化情況，從而實現(xiàn)較短時間的測定。
MST技術(shù)無需固定樣品、無需標記、在溶液態(tài)下完成檢測，更接近生理條件，尤其適合難以純化或易失活的蛋白、膜蛋白、核酸、小分子化合物等體系的互作研究。
服務(wù)優(yōu)勢
- 檢測下限低，弱分子力首選
- 樣本量小，且樣品無需固定
- 能夠測量復(fù)雜混合物（即細胞裂解物、血清、洗滌劑、脂質(zhì)體）
- 相互作用物尺寸范圍廣（離子到MDa復(fù)合物）
- 項目經(jīng)驗豐富，確保數(shù)據(jù)準確可靠， 快速交付結(jié)果！
服務(wù)流程
客戶提供
a ：蛋白推薦干粉，質(zhì)量>50μg；
b ：小分子推薦粉末，質(zhì)量>1mg；
c ：核酸送樣量>5 OD；
d ：干冰運輸足量，出于保存難度，蛋白?般不做返樣。
服務(wù)說明
適用范圍：
蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)（包括抗原-抗體、分子伴侶-底物）、蛋白質(zhì)-核酸、核酸-核酸、蛋白-小分子（蛋白酶與抑制劑、細胞膜蛋白活性）、蛋白-肽、肽-肽等相互作用，比ITC能檢測更微小的相互作用，可檢測任意兩種小分子之間的親和力，其中一個需要有氨基（所有的蛋白都有），帶氨基的要純度高，另一個沒有要求。
技術(shù)對比:
| 項目 | 核心優(yōu)勢 | 蛋白需求量（最低） | 小分子需求 | 核酸送樣量 | 提供參數(shù) | 適用范圍 |
| SPR | 檢測“金標準”，實時監(jiān)測結(jié)合與解離全過程,無需標記,保持分子天然狀態(tài) | 50ug | 1mg | 5OD |
結(jié)合常數(shù)KD |
（蛋白/核酸）和另一種可以計算摩爾濃度的物質(zhì) |
|
結(jié)合速率常數(shù)Ka |
||||||
|
解離速率常數(shù)Kd |
||||||
| MST | 在自由溶液中進行，無需固定、樣品消耗少、接近真實生理狀態(tài) | 50ug | 1mg | 5OD | 結(jié)合常數(shù)KD | （蛋白/核酸）和另一種可以計算摩爾濃度的物質(zhì) |
| BLI | 適合快速篩選與粗樣檢測 | 50ug | 1mg | 5OD |
結(jié)合常數(shù)KD |
（蛋白/核酸）和另一種可以計算摩爾濃度的物質(zhì) |
|
結(jié)合速率常數(shù)Ka |
||||||
|
解離速率常數(shù)Kd |
||||||
| nanoITC | 直接測量結(jié)合熱，提供最完整的熱力學(xué)全景圖 | 300ug | 1mg | 10OD |
結(jié)合常數(shù)KD |
任意兩種可計算摩爾濃度的物質(zhì) |
|
化學(xué)計量比n |
||||||
|
熱力學(xué)參數(shù)dH，dS |
常見問題與解析 (Q&A)
不一定。MST支持熒光標記和非標記兩種模式：若靶標蛋白自帶熒光（如色氨酸熒光）或可特異性標記熒光染料，則無需額外標記配體；若蛋白無熒光，則可選擇標記配體（如小分子熒光衍生物）進行反向檢測。我們可根據(jù)樣品特性推薦最佳方案。
細胞裂解液可以直接用于MST檢測。MST技術(shù)（微量熱泳動技術(shù)）具有對復(fù)雜樣品的兼容性，能夠在細胞裂解液等復(fù)雜生物溶液中分析分子間的相互作用。只要細胞裂解液中的目標分子（如蛋白）帶有合適的熒光標記（例如通過GFP融合表達），就可以直接利用細胞裂解液進行MST實驗，無需對蛋白進行純化。這種方法尤其適用于難以純化的蛋白或需要在近生理條件下研究分子互作的情況。
