RIP技術(shù)（RNA Binding Protein Immunoprecipitation，RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀），是研究細胞內(nèi)RNA與蛋白結(jié)合情況的技術(shù)，是了解轉(zhuǎn)錄后調(diào)控網(wǎng)絡(luò)動態(tài)過程的有力工具。該技術(shù)主要是運?目標蛋?的特異性抗體把相應(yīng)的RNA-蛋白復(fù)合物沉淀下來，然后經(jīng)過分離純化對結(jié)合在復(fù)合物上的RNA進行q-PCR驗證或者高通量測序分析。

• 高特異性與靈敏度

    采用經(jīng)過驗證的高效抗體，精準富集目標RNA-蛋白復(fù)合物，降低非特異性結(jié)合，適用于低豐度樣本。

• 全流程解決方案

    提供超齊全的配套試劑及詳細的實驗流程，解決用戶從樣本處理到數(shù)據(jù)分析的全流程需求。

• 研究細胞內(nèi)RNA與蛋?結(jié)合的情況

• 研究基因表達調(diào)控、RNA穩(wěn)定性、剪接和翻譯機制

Q1：如何判斷RIP實驗成功？

RIP后WB檢測IP組和input組檢測到目的蛋白信號即判斷RIP實驗成功。

Q2：IP和IgG樣本Ct值沒有差異

多方面原因造成：

1.抗體沒有富集到RNA，可更換抗體嘗試；

2.IgG背景過高，可增加洗滌次數(shù)或減少免疫沉淀步驟RNA投入量。

Q3：溶解曲線異常

出現(xiàn)非特異擴增或有引物二聚體等情況，需重新設(shè)計引物。

Q4：拉下樣本RNA濃度過低

1.樣本投入量過少，考慮增加樣本初始投入量。

2.裂解不完全，組織樣本未研磨充分，或者用強裂解液進行裂解。

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