實驗原理
螢火蟲熒光素酶(firefly luciferase)和海腎螢光素酶(Renila luciferase)可分別催化熒光素(luciferin)或腔腸素(coelenterazine)氧化形成oxyluciferin或coelenteramide,并在此過程中產生生物熒光。Double-Luciferase Reporter Assay Kit首先以熒光素為底物檢測螢火蟲熒光素酶報告基因的活性,之后在淬滅該熒光反應的同時,以腔腸素為底物檢測海腎熒光素酶報告基因的活性,具有檢測迅速、靈敏度高、檢測范圍廣、無細胞內源活性干擾等特點。
產品優勢
• 本產品的檢測靈敏度顯著優于市場上同類產品,螢光素酶化學發光的信號穩定。
• 本產品發光強度高于其他品牌。
• 螢火蟲熒光素酶 淬滅效果最佳,遠超市場上其他品牌,熒光殘留量很少,對海腎熒光素酶的再發光幾乎沒有。影響,能提高測試結果準確度,提高數據得可重復性!
• 穩定性好,操作簡單,讀數穩定,檢測速度快。
應用范圍
• miRNA靶基因驗證:通過構建熒光素酶報告載體,驗證miRNA與其靶基因mRNA或lncRNA的結合情況。
• 轉錄因子調控驗證:將轉錄因子的結合位點克隆在螢火蟲熒光素酶基因的上游,通過檢測熒光素酶活性變化來驗證轉錄因子的調控作用。
• 啟動子分析:將啟動子區域序列克隆在螢火蟲熒光素酶基因的上游,通過檢測熒光素酶活性來分析啟動子的活性及其在不同條件下的變化。
• 啟動子SNP分析:一些基因的啟動子區域存在單核苷酸多態性,可運用熒光素酶報告系統分析其相對活性。
試劑盒組分


常見問題與解答
Q:試劑盒在使用過程中有哪些注意事項?
A:Luciferase Reaction Buffer Ⅱ在溶解過程中可能有部分沉淀析出,使?前應充分需蕩或將其置于37℃水浴鍋中,保證其完全溶解后再使用。
Luciferase Reaction Reagent和Luciferase Reaction Reagent Ⅱ反應前需平衡至室溫。
為保證實驗數據準確可靠,建議測量大量樣品時使用排槍添加Luciferase Reaction Reagent和Luciferase Reaction Reagent Ⅱ,使用過程中務必留意排槍各孔吸取的液體是否一致。
Luciferase Reaction Reagent和Luciferase Reaction Reagent Ⅱ均易發生氧化反應,請合理安排實驗,避免樣品解凍后在室溫下長時間放置。



